DETERMINACION DE LÍPIDOS (EXTRACTO ETEREO)
Método Soxhlet
OBJETIVO
Determinar la concentración de la materia grasa cruda o extracto etéreo libre.
Existen diferentes métodos para realizar el análisis cuantitativo del contenido de grasa en alimentos. La elección del método apropiado se hará en función del material de la muestra, la exactitud requerida y la rapidez con que se necesiten los resultados. Entre los métodos clásicos están la extracción con disolventes o Soxhlet en los que la muestra es sometida a una digestion con ácido clorhídrico antes de la extracción. Hoy en día, las extracciones Soxhlet están en gran parte automatizadas permitiendo procesar varias muestras simultáneamente. Estos sistemas ofrecen al usuario muchas ventajas, tales como uso fácil, recuperación de disolventes, funciones de seguridad y requerimiento de poco espacio en la mesa de trabajo. La programación del tiempo y el número de ciclos de extracción garantiza extracciones bajo condiciones reproducibles. Además, la posibilidad de calentar los puestos individualmente permite ahorrar energía.
DETERMINACIÓN DE LA GRASA
El contenido en lípidos libres, los cuales consisten fundamentalmente de grasas neutras (triglicéridos) y de ácidos grasos libres, se puede determinar en forma conveniente en los alimentos por extracción del material seco y reducido a polvo con una fracción ligera del petróleo o con éter dietílico en un aparato de extracción continua. Se dispone de éstos en numerosos diseños, pero básicamente son de dos tipos.
El material extraído aumenta con la polaridad del disolvente de 9 % usando éter de petróleo cambiando a hexano, heptano, éter dietílico, disulfuro de carbono, ciclohexano, benceno, cloruro de metileno, tricloroetileno, cloroformo y acetona hasta casi el 16 % con dioxano.
La extracción completa de la grasa neutra es estorbada por la presencia de cantidades elevadas de sustancias solubles en agua como carbohidratos, glicerol y ácido láctico.
FUNDAMENTO
Una cantidad previamente homogeneizada y seca, medida o pesada del alimento se somete a una extracción con éter de petróleo o éter etílico, libre de peróxidos o mezcla de ambos. Posteriormente, se realiza la extracción total de la materia grasa libre por soxhlet.
MATERIAL Y EQUIPO
- o Sistema extractor Soxhlet
- o Balanza analítica
- o Algodón desgrasado
- o Papel filtro o dedal de celulosa
- o Baño termorregulado (40°C Temperatura constante)
- o Estufa de secado
- o Desecador
- o Pinzas para crisol
- o Probeta
- o Manto calefactor o rotavapor
REACTIVOS
- o Éter etílico
PROCEDIMIENTO
b) Pesar el matraz de extracción a peso constante.
c) Montar el matraz en el sistema Soxhlet y la muestra preparada en el tubo de extracción.
d) Adicionar 160 mL de éter etílico al condensador del sistema.
e)Efectuar extracción durante 3 horas con una velocidad de condensación de 2 gotas/seg.
f)Eliminar el solvente por evaporación en el rotavapor.
g) Secar el matraz con la grasa en estufa por 15 min hasta peso constante.
CALCULOS Y RESULTADOS
% de Extracto etéreo = P – p / M x 100
Donde:
P = Peso en gr del matraz con grasa
p = Peso en gr del matraz sin grasa
M = Peso en gr de la muestra
% de lípidos como extracto etéreo = N/P x 100
Datos:
P = 100.3478 gr
p= 100.3270 gr
M = 2 gr
% Extracto etéreo = (100.3478gr – 100.3270gr) x 100 = 1.04
OBSERVACIONES
Las grasas son extremadamente insolubles en agua, por lo cual utilizamos como disolvente el éter etílico para poder determinar la cantidad de la misma en el producto problema.
Primero aislamos la grasa por extracción con el disolvente y después recuperamos este disolvente y se determino el residuo por pesada.
El sistema que utilizamos para la determinación fue el extractor Soxhlet, que consta de un matraz en el que se hace hervir el disolvente y se recoge posteriormente junto con la grasa, un tubo de extracción que es en donde se coloca la muestra y se realiza la extracción, con un mecanismo tipo sifón que hace que se vacíe cuando el liquido alcanza un nivel determinado y un refrigerante donde se condensa el disolvente que ha de caer sobre la muestra.
La muestra utilizada para esta práctica fue la tratada la práctica anterior: Cereal Corn Flakes de Kellogg´s.
Comparando los resultados obtenidos en el laboratorio con la información nutrimental proporcionada en la caja del cereal:
| | CANTIDAD DE MUESTRA | GRSAS LIPIDAS | EXTRACTO ETEREO |
| INFORMACION NUTRIMENTAL (Presentación en la caja) | 30 g | 0.27 g | 1 % |
| RESULTADOS DE LABORATORIO | 2 g | 0.0208 g | 1.04 % |
0
Esto nos indica que no hubo mucha diferencia entre los resultados obtenidos en el laboratorio y la información nutrimental que muestra la caja del cereal.
Esta determinación se realiza bajo la normal oficial:
NMX-F-089-S-1978. DETERMINACIÓN DE EXTRACTO ETÉREO (MÉTODO
SOXHLET) EN ALIMENTOS.
CONCLUSION
Determinamos la concentración de extracto etéreo en una muestra de cereal mediante el sistema de extracción Soxhlet. Los resultados que obtuvimos en el laboratorio fueron similares a los presentados en la caja de cereal
REFERENCIAS
- o Manual Practico del Laboratorio de Analisis de Alimentos de la Faculta de Químico Farmacobiología; UMSNH
- o http://www.catlab.com.ar/notas.php?idm=701&accion1=notas&PHPSESSID=ea46bbcbfe6d4dae74d7ca0e881d7fdc
- o http://www.ispch.cl/lab_amb/met_analitico/doc/ambiente%20pdf/GrasSoxhlet.pdf
- o www.itescam.edu.mx/principal/sylabus/fpdb/recursos/r22453.DOC
- o http://www.colpos.mx/bancodenormas/nmexicanas/NMX-F-089-S-1978.PDF
DETERMINACIÓN DE FIBRA CRUDA
OBJETIVO:
Realizar la determinación del porcentaje de fibra cruda en una muestra de fibra problema de cereal previamente deshidratada.
FUNDAMENTO
La fibra representa la porción no digerible de los alimentos y, por consiguiente, mientras mayor sea su concentración en un producto dado, menor será su valor alimenticio, aunque es importante recomendarlo para el buen funcionamiento del intestino. La naturaleza química de la fibra cruda, aún cuando no está bien establecida, se considera constituida por celulosa, hemicelulosa y lignina.
Su determinación se basa en la simulación de la digestión en el organismo por tratamientos ácidos y alcalinos, separando los constituyentes solubles de los insolubles que constituyen los desperdicios orgánicos a través de las heces.
Con fundamento en lo dispuesto en los Artículos 1º, 2º, 4º, 23, inciso C y 26 de la Ley General de Normas y de Pesas y Medidas, publicada en el Diario Oficial de la Federación con fecha 7 de abril de 1961, esta Secretaría ha aprobado la siguiente Norma Mexicana “DETERMINACIÓN DE FIBRA CRUDA EN ALIMENTOS” NMX-F-S-1978.
1. Esta Norma Mexicana establece el procedimiento para la determinación de fibra cruda en productos alimenticios.
2. Este método se basa en la digestión ácida y alcalina de la muestra obteniéndose un residuo de fibra cruda y sales que con calcinación posterior se determina la fibra cruda.
El método es aplicable a granos, platos preparados, harinas, alimentos para animales, materiales que contienen fibra de los cuales la grasa ha sido extraída para dejar un residuo adecuado.
Fibra cruda es la pérdida de masa que corresponde a ala incineración del residuo orgánico que queda después de la digestión con soluciones de ácido sulfúrico e hidróxido de sodio en condiciones especificas.
FIBRA CRUDA
"Fibra cruda" es el residuo orgánico combustible e insoluble que queda después de que la muestra se ha tratado en condiciones determinadas. Las condiciones más comunes son tratamientos sucesivos con petróleo ligero, ácido sulfúrico diluido hirviente, hidróxido de sodio diluido hirviente, ácido clorhídrico diluido, alcohol y éter. Este tratamiento empírico proporciona la fibra cruda que consiste principalmente del contenido en celulosa además de la lignina y hemicelulosas contenidas en la muestra. Las cantidades de estas sustancias en la fibra cruda pueden variar con las condiciones que se emplean, por lo que para obtener resultados consistentes deben seguirse procedimientos estandarizados con rigidez. Es difícil definir la fibra con precisión. Al terminar debe asociarse estrictamente con indigestibilidad.
La fibra debería considerarse como una unidad biológica y no como una unidad química. La pared celular de las plantas tiene una estructura compleja compuesta de celulosa y hemicelulosa, pectina, algo de proteína, sustancias nitrogenadas lignificadas, ceras, cutina y componentes minerales. Este material se divide a su vez en sustancias insolubles de la matriz, que incluyen la lignina, celulosa y hemicelulosa, y las más solubles como la pectina, ceras y proteína, que se pueda extraer.
La pared celular de las células vegetales, contiene la mayor parte del material resistente a las enzimas del tracto gastrointestinal de los mamíferos. Aunque este material pueda digerirse parcialmente por la microflora intestinal, raramente la digestión es total.
La fibra también le da las propiedades físicas a los alimentos, y generalmente baja la densidad calórica de los alimentos.
FIBRA DIETETICA
El papel de la fibra indigerible o alimento o forraje indigesto en la dieta en el mantenimiento de salud, es ahora considerado tan importante nutricionalmente como los niveles de nutrimentos absorbibles en los alimentos. Los métodos empíricos para determinar el contenido en fibra cruda son de uso limitado porque los resultados pueden representar tan poco como 1/7 de la fibra dietética total de ciertos alimentos. La fibra dietética puede ser definida como constituida por todos los componentes de los alimentos que no son rotos porque las enzimas del conducto alimentario humano para formar compuestos de masa molecular menor, capaces de ser absorbidos al torrente sanguíneo. Estos incluyen hemicelulosas, sustancias pépticas, gomas, mucílagos, celulosa, lignina y polisacáridos tecnológicamente modificados tales como la carboximetilcelulosa. Debe hacerse notar que algunas de estas sustancias no tienen estructura fibrosa y son solubles.
Se han desarrollado diferentes métodos para la estimación de la fibra dietética. Dado que no es posible determinar los muchos componentes complejos individualmente de la fibra dietética, los métodos de uso práctico representan un compromiso entre la separación completa y su determinación y la aproximación empírica de fibra cruda.
MATERIAL Y EQUIPO
1. Tubo de centrífuga de 50ml.
2. Centrífuga.
3. Estufa de secado.
4. Desecador.
5. Probetas graduadas de 100 y 200ml.
6. Matraz Erlen Meyer de 1000ml.
7. Vaso de Berzelius de 600ml.
8. Embudo Buchner.
9. Tela de lino.
10. Crisol de Gooch.
11. Papal tornasol.
12. Pipeta graduada de 5 y 10ml.
13. Mufla.
14. Pinzas para crisol.
15. Embudo de cuello corto.
16. Arillo.
17. Soporte universal.
18. H2SO4 0.225N (1.25%).
19. NaOH 0.313N (1.25%).
20. Hcl 1%.
21. Alcohol.
PROCEDIMIENTO
1. Pesar 2gr de muestra.
2. Transferir a vaso de Berzelius.
3. Añadir 200ml de H2SO4.
4. Acoplar vaso al condensador.
5. Iniciar calentamiento y mantener durante 30minutos.
6. Desacoplar el vaso.
7. Filtrar y lavar con agua destilada caliente.
8. Medir pH con papel tornasol.
9. Transferir muestra.
10. Añadir 200ml de NaOH
11. Acoplar vaso al condensador.
12. Iniciar calentamiento y mantener durante 30 minutos.
13. Filtrar y lavar con HCl 1%.
14. Lavar con alcohol (20ml).
15. Llevar el residuo a la estufa y secar a 105 ° C por espacio de 2 horas.
16. Enfriar y pesar (peso P1).9.
17. Coloque en la mufla a 500-600° C hasta que el contenido sea de color blanco (aproximadamente una hora).
CÁLCULOS
%Fibra cruda (p/p) = n/p x 100
n = Gramos del residuo.
P = Gramos de la muestra.
RESULTADOS
Toda la materia orgánica se digirió en el proceso y por lo tanto, se considera que la muestra contenía muy poca o nada de fibra insoluble.
OBSERVACIONES
1. Al filtrar la muestra que se encontraba disuelta en H2SO4 y después de lavar, se obtuvo poca muestra sin disolver (digestión ácida).
2. Cuando se filtró la muestra disuelta en NaOH, quedó una mínima cantidad poco visible de muestra, sin embargo, por falta de equipo no se pudo continuar con el procedimiento (digestión básica)
CONCLUSIÓN
Después de analizar los resultados obtenidos, se concluye que la muestra contenía muy poca o nada de fibra insoluble. Toda la materia orgánica se eliminó después del proceso digestivo.
REFERENCIAS
1. http://docencia.izt.uam.mx/lyanez/analisis/practicas/fibra%20cruda.doc
2. http://www.colpos.mx/bancodenormas/nmexicanas/NMX-F-090-S-1978.PDF
3. http://www.ispch.cl/lab_amb/met_analitico/doc/ambiente%20pdf/FIBRACRUDA.pdf
